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InvivoGen 新品推荐:核酸转染增强剂——NATE?

时间:2019-08-23 作者:市场部 文章来源: 浏览:74

产品介绍:

NATE?InvivoGen设计的一种核酸转染增强剂可以提高难转染细胞的瞬转与稳转效率,尤其适合人的单核细胞与小鼠巨噬细胞等难转染的细胞,如外周血单核细胞(THP-1)和小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW 264.7),且只需在平时加转染试剂操作前30min加入NATE?即可。值得注意的是,NATE对细胞温和,不会对细胞培养产生任何进一步的毒性。


真核细胞转染过程中,外源性核酸(如质粒)的主要障碍被胞质传感器检测cGAS/STINGAIM2炎性小体和LC3介导的自噬。这些防御信号级联的激活常常会降低转染率和细胞存活率,特别是在难以转染的细胞(如免疫细胞)中会更明显。当使用NATE?时,这些核酸传感通路将被抑制,从而在转染过程中保护质粒并促进其表达。




产品特色:

与常用转染试剂?(e.g. GeneXPlus, Lipofectamine? LTX, and jetPRIME?) 及物理方法兼容。

更高的转染率,也适用于大质粒?(> 10kb)

在所有的转染测试方案中都显示对细胞温和,没有毒性。


产品信息:

Product Name

Unit?Size

Cat.?code

NATE?

1 mL (100 reactions)

lyec-nate


应用举例


利用GeneXPlusGFP标记的质粒(3kb)瞬时转染到THP-1细胞中48小时后,荧光显微镜观察使用NATE?后转染效率明显增加。



利用GeneXPlusLipofectamine LTXjetPRIMEnucleofection等常用转染方法,将~3kb质粒()~8kb质粒()瞬时转染至THP-1细胞。48小时后用流式细胞术检测转染效率与不使用NATE?转染相比,数据有明显差异变化。


详细说明



在真核细胞转染过程中,外来核酸(如质粒DNA)的主要障碍是它们自身被胞质核酸传感器检测,如黑色素瘤缺乏因子2 (AIM2)和环GMP-AMP合成酶(cGAS)介导的自噬

AIM2是一种细胞质传感器,与双链DNA (dsDNA)结合后,会形成一种称为炎性体的蛋白质复合物。最终炎症细胞因子IL-1βIL-18的成熟需要通过相应的AIM2 炎症小体的形成和半胱天冬氨酸蛋白水解酶1caspase-1)的活化来完成。这些细胞因子的产生不利于转染成功。


cGAS能识别dsDNA,并通过STING/TBK1/IRF3信号轴诱导I型干扰素(IFNs)的产生,以及一些干扰素刺激基因(ISGs)的表达,这些强大的效应功能,在转染中是非常多余的。

此外,STING的激活不依赖于TBK1-INF可以导致LC3相关的自噬。最终,自噬体将形成包含外来核酸(如质粒)的形式,并与溶酶体融合细胞中降解



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